橫向流動分析和應用

橫向流動分析(LFA)因其簡便、高效而被廣泛應用於護理點檢測中。在本文中,我們將介紹後期流動分析的科學原理和在以下領域的應用:

  1. COVID-19抗體快速檢測
  2. 新型冠狀病毒疫苗研製中和抗體試驗
  3. 妊娠(HCG激素)檢查
  4. 人體免疫缺陷病毒(HIV)測試
  5. 乙型肝炎病毒(HBV)檢測

什麼是橫向流動試驗

橫向流動分析(LFA)是一種診斷程序,應用於檢測和定量某些分析物存在於複雜的混合物。待檢測的樣品分析物保存在一個測試設備上,以便在5到30分鍾的時間內顯示結果。lfa所需的測試樣品應大部分處於液體狀態。由於其易於操作的格式,低成本,短的分析時間橫向流量測試工具已經在需要快速診斷測試的大多數領域發現了它們的應用,如醫院、臨床實驗室和醫生診所。除了在專業的醫療設施中應用外,這些檢測方法在家中也顯示出極大的診斷檢測便捷性。有人建議,大約10微升的測試樣品可以充分執行橫向流動分析,以確定樣品分析物。橫向流動分析的結果通常是定性的,這表明它隻能回答分析物的存在或不存在。然而,對成分材料、試劑和閱讀器技術的修改可以使LFAs成為定量的,並提供當前血液樣本中分析物的精確濃度。

橫向流量測試工具

橫向流動試驗的類型

基於待測定的樣品元素,有兩種側向流動測定方法。LFA的第一種也是最常見的一種是橫向流動免疫分析法(LFIA)。LFIA又分為兩類,一類是抗體作為主要識別成分,另一類是蛋白質、激素等其他識別成分的靶標。LFA的另一種類型包括核酸側流檢測,用於檢測聚合酶鏈反應(PCR)過程中可能產生的擴增子。PCR是一種技術,用於將特定的DNA樣本放大到足夠大的濃度,以建立進一步的研究。

橫向流動測定原理

側流法的原理與ELISA法有很高的相似度。LFA測試設備的聚合條由與流體樣品中的目標分析物相互作用的幹試劑組成。該設備檢測幹試劑和液體樣品之間的相互作用,並檢測目標分析物。由目標分析物組成的液體樣品在毛細管作用的幫助下通過聚合帶的不同區域。測試帶由重疊的薄膜組成,安裝在背卡上,以獲得更好的穩定性和處理。

COVID-19 IgM IgG側流法檢測原理

當進行橫向流動分析時,樣品被應用在吸附劑樣品墊上,它通常位於條的一部分。樣品墊內嵌有緩衝鹽和表麵活性劑,負責樣品基質的前處理,使其更適合於與幹試劑的相互作用。處理過的樣品然後遷移到條帶的另一部分,稱為共軛釋放墊,它由抗體或其他物質結合到目標分析物。在相互作用後,抗體與目標一起向LFAs上的檢測區域移動,該區域由另一組抗體或成分組成,這些抗體或成分與目標分子發生反應,這些分子與前一區域中的抗體結合。一個格羅寧根大學醫學中心的研究表明,該化合物的濃度對應於樣品中目標分析物的濃度。如果該化合物在測試線上產生反應,則表明該樣品含有目標分析物。然而,控製線的響應確認了液體通過帶鋼的適當流動。不同強度的線條可以通過眼睛或專門的讀者來解讀。如果LFA用於測試多種分析物,則設備上有不同的測試線。吸附劑墊在帶的末端,以避免回流和抽芯過量的試劑。標簽是樣品分析物的檢測單元。金納米顆粒通常被用作橫向流動分析過程的標簽,因為它滿足所有的要求。

新型冠狀病毒抗體快速檢測試劑盒

COVID-19大流行影響了幾乎每個國家對日常生活方式的定義。為抗擊疫情,開展嚴格檢測顯得尤為重要。LFA被認為是新型冠狀病毒檢測中最有前途的技術之一。橫向流動免疫分析法負責檢測人體暴露於異物(即SARS-CoV-2,在本例中導致COVID-19)時產生的抗體。

人類免疫係統產生第一種抗體“IgM”,它能立即與冠狀病毒結合。據報道,新感染病毒5天後,人體內就會出現IgM抗體。但是,在COVID-19發生8 ~ 10天後,IgG抗體與病毒的結合親和力較高,因此對抗病毒的效率更高。的COVID-19 IgM/IgG抗體檢測試劑盒定性檢測IgG和IgM抗體共同或單獨存在,從而研究感染患者的免疫反應。因此,COVID-19橫向流動試驗不能直接檢測感染者體內的SARS-CoV-2,但可以用於了解受影響個體的免疫反應行為,這可能對抗擊COVID-19全球大流行有重大貢獻。

新型冠狀病毒疫苗中和抗體檢測發展

中和抗體通過與遊離細胞的病毒結合,防止其感染細胞,從而防止病毒感染。幾項研究表明,這些抗體可能在預防新型冠狀病毒株方麵發揮重要作用。在SARS-CoV-2感染後,宿主會產生這些中和抗體,以減少再次感染的機會。據報道,2019年新型冠狀病毒出現的刺突蛋白是一種糖蛋白,介導病毒侵入人體細胞,可以作為中和抗體的靶點。最近的一項研究表明,如果獲得高濃度的抗SARS-CoV-2刺突蛋白的中和抗體,COVID-19疫苗就可以證明是有效的。中和抗體的檢測可作為臨床階段對COVID-19免疫評價的有效方法,對新型冠狀病毒疫苗接種效率的檢測具有重要意義。因此,檢測中和性抗體有助於開發COVID-19疫苗。24小时娱乐服务JOYSBIO啟動了一個快速的橫向流動新型冠狀病毒中和抗體檢測試劑盒半定量檢測血清、血漿和全血樣本中SARS-CoV-2的中和抗體水平。

LFA孕期應用(HCG激素)測試

絨毛膜促性腺激素的快速檢測是確定早期妊娠最方便的方法之一。在懷孕早期,HCG是一種激素,負責阻止子宮內膜每月脫落,以避免月經周期。由於HCG是一種蛋白質,它可以很容易地通過LFIA技術被檢測出來。HCG由幾個多基因位點組成,這表明抗體可以在多個地方結合HCG激素,直接或三明治法應用於LFIA。絨毛膜促性腺激素橫向流動試驗,或妊娠試驗,被用來確定尿樣中絨毛膜促性腺激素的濃度。

用於診斷艾滋病毒的快速檢測盒

另一個非常常用的商業應用側向流動試驗診斷人類免疫缺陷病毒(HIV)。HIV-1型特異性抗體主要是針對HIV-1 B亞型抗原產生的。已有報道,HIV特異性抗原的應用比間接免疫分析具有更好的效果。HIV檢測盒可以利用HIV特異性抗體的多價態捕獲並檢測HIV感染的試劑。這可以檢測在HIV-1和HIV-2抗體早期診斷中發揮重要作用的多種抗體類別,這可能對艾滋病毒預防和治療的整體效率產生相當大的影響。

肝炎病毒的橫向流動檢測方法

乙型肝炎病毒(HBV)在全球流行率很高,是可預防死亡的主要原因之一。HBV護理點(POC)是HBV最常用的診斷技術。它由與HBV互補的特異性抗體組成。這些檢測通常是定量的,讀出的結果是二元的,隻包括HBV的存在和不存在。雖然LFIAs是定性的,但研究表明它具有較高的敏感性,可以減少假陽性和假陰性的發生,從而具有較高的準確性。人血清或血漿,也就是全血,可以用來進行丙型肝炎病毒(HCV)的快速檢測。橫向流動試驗對丙肝病毒的檢測也具有很高的敏感性。

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