Covid-19的可用測試方法

新冠肺炎疫情的爆發動搖了發達國家的經濟,甚至動搖了衛生保健係統。本文探討了全球範圍內用於人類COVID-19診斷的不同技術,其原理、測試程序、周轉時間、測試環境、優缺點。以下是本文討論的COVID-19測試方法列表:

  1. RT-PCR基SARS-COV-2檢測
  2. Covid-19病毒抗原測試
  3. COVID-19基於抗體的檢測
  4. 橫向流動快速Covid-19抗體試劑盒
圖1-顯示了全球Covid-19的塗抹。

RT-PCR基SARS-COV-2檢測

實時RT-PCR是COVID-19檢測方法中最常用的一種,用於區分COVID-19活動性感染。盡管許多國家已經使用連續RT-PCR來診斷不同的疾病,例如埃博拉和寨卡病毒感染,但許多國家在調整這一技術以應對COVID-19感染方麵需要支持,就像擴大國家檢測範圍一樣。

從體內聚集的一個例子,其中Covid-19感染累積,例如,個體的鼻子或喉嚨。用幾種混合物安排治療這種情況,疏散物質,例如蛋白質和脂肪,並將其剛剛脫離樣品中存在的RNA。這種改進的RNA是個體遺傳物質的混合,如果存在的話,感染的RNA。

利用特定的蛋白質,RNA被相反地解釋為DNA。在這一點上,研究人員包括DNA的其他短片段,與解釋病毒DNA的明確片段組成。在一個極小的機會,感染是可用的例子,這些片段連接自己的目標片段的病毒DNA。在增強過程中,一部分額外的遺傳部分用於構建DNA鏈,而其他部分用於創建DNA並向鏈添加標記名,然後用於識別感染。

實時RT-PCR程序非常敏感和明確,可以在短短三個小時內傳遞一個可靠的決定。然而,研究中心平均花費6到8個小時。與其他可接近的感染分離策略相比,連續RT-PCR本質上更快,汙染或錯誤的可能性更低,因為整個過程可以在一個封閉的圓筒內完成。它一直是識別COVID-19感染最精確的戰略。

Be that as it may, real time RT–PCR can’t be utilized to identify past diseases, which is significant for understanding the turn of events and spread of the infection, as infections are just present in the body for a particular window of time. Different techniques are essential to identifying, tracking, and studying past contamination, especially those who may have created and spread without side effects.

圖2-新型冠狀病毒SARS - CoV - 2的診斷方法

Covid-19病毒抗原測試

COVID-19抗原檢測試劑盒被認為是另一種COVID-19檢測方法,用於診斷COVID-19活動性病例,特別是在感染過程的早期,並確定患者是否傳染給他人。通過檢測鼻腔、口腔和呼吸道的病毒抗原,可以確定患者是否在主動傳播病毒。在感染早期,這些檢測可能是最易於操作的實用方法,因為它們可以幫助在症狀出現前2天確認病毒的存在。考慮到抗體可能要到症狀出現後6-7天才能檢測到,抗原檢測可將診斷窗口期延長至9天。病毒脫落的持續時間可以高度可變,並取決於症狀的嚴重程度、病程和患者特異性免疫反應。一般來說,出現症狀後21 - 35天或無症狀後3 - 5天是檢測不到病毒脫落的。

因此,抗原測試具有明確的作用作為診斷工具箱中的重要工具,用於檢測活性SARS-COV-2感染。

Covid-19抗原試驗設計在ELISA(酶聯免疫吸附測定)和側向流動快速測試盒式型盒。ELISA測試通常為您提供更準確的測試結果,但實驗室的要求可以是具有有限的醫療資源的發展中國家的瓶頸01。一個橫向流動測定基於Covid-19抗原試驗或抗原快速測試試劑盒可以幫助篩選Covid-19活性感染。與HIV快速測試盒類似,Covid-19抗原快速測試試劑盒采用血清,血漿或指尖血液,並在20分鍾內給出視覺上可解釋的結果。因此,抗原試驗盒可以在護理環境下測試活性SARS-COV-2感染的醫療保健專業人員的重要幫助。

COVID-19基於抗體的檢測

隨著2019冠狀病毒病(COVID-19)大流行的迅速加速,人們紛紛開發檢測人體在接觸/感染新冠病毒時產生的抗體的檢測方法。這些測試方法依賴於前麵描述的抗原-抗體結合親和力。該測試原理依賴於在實驗室中生產的重組抗原,設計成模仿病毒的特定結構,導致存在於全血或血清中的任何抗體與抗原具有結合親和力。檢測的特異性可以高度依賴於目標抗原的選擇,因為一些病毒結構可以在廣泛的病毒家族中高度保守,而其他病毒結構可以高度衍生並特異性於給定的毒株。因此,有必要了解對其他傳染病的交叉反應性,以避免可能檢測到來自類似病毒的抗原,但不提供對SARS-CoV-2的免疫力的假陽性結果。

以實驗室為基礎的ELISA抗體檢測由靈敏的實驗室儀器讀取,並將受控的等分送到檢測係統,可視為定量或半定量檢測。因此,他們可以確定在單位體積的血清中存在多少給定的抗體(滴度水平)。當操作在檢測邊緣時,它們的靈敏度和特異性可以高於基於橫向流量的設備。然而,這些係統有真正的缺點。基礎設施成本、靜脈穿刺的要求、樣品處理的額外步驟、獲得結果的時間和實際吞吐量的挑戰都是有問題的,並大大增加了每次測試的成本。

在COVID-19抗體快速檢測(或橫向流動檢測試劑盒)中,血清中的抗體與塗在檢測條上的抗原結合,並通過毛細管力沿檢測條的長度橫向移動。在檢測試劑盒的指示區域,塗在檢測條上的抗人抗體會結合形成抗原-抗體複合物,並將其保持在指示區域。膠體金,或另一種著色劑,積聚在指示區域,導致可見的顏色變化和燈芯基質的窄帶。可能有一個或多個指示區域具有針對IgM、IgG或其他免疫球蛋白(如IgA)的抗人抗體。所有的檢測還應該包含一個“控製”指示線,以確認檢測樣品在檢測長度上有適當的偏差,並且檢測試劑盒中的抗原仍然是可行的,因此建立了一個正確的檢測程序。整個過程,從手指到結果,隻用了不到15分鍾。

橫向流動快速Covid-19抗體試劑盒

最多COVID-19抗體檢測試劑盒包含IgM和IgG抗體的指示線,有幾種不同的組合和可能發生的結果的相應解釋。結果本身應始終由衛生保健專業人員根據包裝說明書和使用特定檢測試劑盒的說明進行解釋。下麵的討論有助於將典型抗體測試的二元結果與臨床意義聯係起來,並為患者和工作人員提供明智的建議。如前所述,IgM抗體在感染後的短期內產生,而IgG抗體的產生則有較長的時間尺度。

Covid-19側流快速測試套件盒式磁帶
圖3 - Covid-19抗體測試套件(盒子)

尚未確定由SARS-COV-2 IgG抗體賦予的功能性免疫的臨床水平,以及它們的臨界濃度截止值。因此,建議必須基於類似的病毒和免疫係統的知識。為了解釋結果,對社區行為進行有意義的建議,以測試收件人,必須考慮幾個因素:

  • 抗體檢測時受試者是有症狀還是無症狀?
  • 如果症狀,症狀發作以來多久了?
  • IgM陽性還是陰性?
  • IgG陽性或陰性?

當主題在測試時對象無症狀解釋結果

IgM和IgG均為陰性

實驗對象不敏感的免疫係統沒有對客觀病毒抗原產生任何抗體。如果有可能是在開始發燒或不同症狀後的7天以上,那麼這種疾病很可能不是COVID-19。然而,如果可能,根據病史和副作用,可以進行全麵檢查,包括COVID-19、流感和細菌性支氣管炎。僅靠免疫測試無法排除COVID-19的可能性是,它的副作用開始以來已經少於7天。

IgG陽性,IgM陰性

受試者的免疫係統為目標病毒抗原產生抗體。該主題可能在疾病課程的後期階段,但可能對他人仍然具有傳染性並能夠傳播它。受試者應保持從疾病陰性人群中分離至少14天,以縮減蔓延的可能性。例如,如果對社區工作更快速回報,例如,對於關鍵行業工人,應進行分子測試以評估病毒脫落狀態。

IgM是陽性的,IgG是陰性的

受試者的抗性框架是有效地產生與目標感染的持續汙染的抗體。該問題應該迅速從可靠的人民隔離,尋找適合他們經曆的表現嚴重性的臨床考慮。這個主題可以將疾病蔓延到現在在疾病課程中的其他人。在任何事件14到21天後,該問題應該繼續測試,以便在回到典型練習之前決定IGG狀態。

IgM和IgG都是積極的

實驗對象的堅不可摧的框架正在有效地產生抗體來對抗一種始於14天前的持續疾病。這個問題應該立即從健康人群中脫離出來,並尋找適合他們所經曆的副作用嚴重性的額外臨床考慮。幾乎可以肯定,實驗對象仍然可以將感染傳染給其他人。考慮在7到14天內繼續檢測,確認IgG水平,然後再恢複正常鍛煉。在極小的機會,逐步迅速回到網絡,活動是合理的;例如,對於必要的工業工人,應該進行亞原子測試來調查病毒的脫落情況。

如前所述,無論用於檢測抗體的檢測方法如何,這些檢測都不被設想為診斷活動性感染的一種方法。這主要是因為:1)從接觸病毒到免疫係統產生抗體之間有一段時間的滯後;2)在人體清除了感染後,抗體仍會長期存在。這些檢測是一個很好的工具,可以與分子檢測、病史和臨床表現並行使用,用於有症狀的患者,或用於無症狀患者在一段時間內了解恢複活動的建議。SARS-CoV-2與暴露、症狀的出現、IgM和IgG的產生、症狀的消除以及病毒在整個疾病過程中的脫落有關的時間框架尚未被明確量化。

2019冠狀病毒病抗體測試可以為人們提供必要的信息,了解他們對無休止的大流行的功能性免疫力,讓人們平靜地意識到這一點,並支持有關重返社區活動和工作場所的決定。這些檢測還為公共衛生代表提供了有關病毒在不同社區肆虐的寶貴證據,特別是考慮到報告的大量無症狀病例。此外,盡管抗體狀態不是主要的診斷工具,但對於症狀出現7天後出現的疑似非危重病例,抗體狀態可用於輔助臨床診斷。在這些情況下,使用簡單、具有成本效益的即時抗體盒係統可以減輕分子檢測吞吐量的壓力,使這些資源更迅速地提供給急病和危重患者。的美國疾病預防控製中心目前還沒有結論,我們是否可以利用抗體檢測結果來做出公共衛生決策。

以上討論的這些COVID-19檢測方法正在全球範圍內被用於檢測正在流行的COVID-19,但科學家們正在努力開發更快速、更敏感和更可靠的技術。這些技術仍在試驗中,僅在COVID-19大流行期間作為緊急用途發布。

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